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0 人阅读发布时间:2026-09-22 10:21

Cleavage Under Target & Tagmentation(CUT&Tag)是一种新兴的DNA-蛋白质互作研究方法。CUT&Tag以融合了Protein A/G 的转座酶为核心,融合蛋白通过Protein A/G与抗体结合,使得转座酶被栓系在靶位点周围,从而在目的位点附近进行酶切反应,并同时引入二代测序所必需的接头序列,产物DNA 经过后续提取与PCR 扩增后得到文库,可直接用于高通量测序。

01 预实验5折
▪预实验方案:试做一个样本,评估建库结果与测序质控包含:
1.靶标实验:靶标抗体的CUT&Tag实验;
2.阴性对照:使用IgG一抗作为检测抗体,进行实验;
3.阳性对照:同步设置已知有效的阳性对照。
▪用以验证:
1.一抗的特异性与效价;
2.实验操作流程的稳定性。
02 赠送每组IgG阴性对照
采用同宿主同种型的真实IgG对照并走完全流程,以扣除一抗非特异与Tn5本底、排除假阳性,而非二抗背景对照。
高分文章必备

Kunitomi H, Khaine AM, Jamee R, et al. eIF4G2-mediated selective translation of chromatin regulators safeguards adult intestinal stem cell identity and differentiation. Cell Stem Cell. 2026;33(6):1000-1015.e11. IF=23.3 Q1
03 每个样本赠送mRNA测序
CUT&Tag联合RNA-seq进行全基因组交叉筛靶。CUT&Tag信号峰富集位点代表靶标转录因子的结合,联合RNA-seq的差异表达基因进行筛选,得到的候选基因能够支撑了下游的机制实验方向

Deng Q, Chen Y, Chen Z, Fu Z. SPIB suppresses protective autophagy via the IFIT2/PINK1/Parkin axis to promote anoikis in colorectal cancer. Cancer Cell Int. 2026;26(1):133. IF=7.0 Q1
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