单细胞测序送样指南（一）血液、骨髓及各类体液

在单细胞时空组学飞速发展的当下，测序平台日新月异、通量与捕获效率屡破新高。但一个始终未变的金科玉律是：下游的数据质量上限，取决于样品的起始状态。单细胞实验没有“亡羊补牢”，每一步都直接决定了成千上万个单细胞的数据产出与生物学真实性。

为了帮助大家绕开送样路上的那些“隐形暗坑”，确保每一个珍贵的样品都能高保真释放产出应有的科研价值，我们特别策划并推出《单细胞送样指南》专题系列。

本系列将立足一线实战与技术服务经验，围绕取样流程、样本量、风险提示和运输要求及各类样本实操细节展开，手把手带大家拆解单细胞送样的全流程要点。

今天，让我们从第一篇正式启程——血液、骨髓及各类体液。

血液（骨髓）样本

（1）采血：用EDTA抗凝管（紫盖）采集血液≥3 mL；禁用肝素抗凝管、禁用留置针采血（肝素残留抑制逆转录酶效率）。建议采集清晨空腹静脉血。

（2）混匀：采后轻柔颠倒混匀，确保不出现血凝块。

（3）全血整管送样：中性粒脆弱，裂红与分离均造成大量丢失。

（4）信息登记：按照规范标注样本名。

（5）包装：管口封口膜、直立放入密封袋，避免挤压与剧烈震荡；切忌干冰、液氮，且不得与冰袋直接接触。

（6）送样：

如果关注中性粒细胞：常温、采集后尽快送达伯豪实验室（2 h内最佳）。

如果不关心中性粒细胞：2~8 ℃运输、24 h内送达；如果24 h内无法送达，优先分离PBMC+伯优® 21904-10保存液、2~8 ℃运输、48 h内送达；无法保证48 h则梯度冻存后干冰运输（冻存前活性 >90%），干冰运输至伯豪实验室。

体液样本

（1）准备：根据体积多少选择合适的无菌容器承装，并用做好信息标记；

（2）包装：装入提前标记好的样品袋并密封；

（3）运输：如需临时存放，需置于2～8 ℃环境；尽快2～8 ℃运输，24 h内送达伯豪实验室。

[1] Liu ZQ, Dai H, Yao L, et al. A single-cell transcriptional landscape of immune cells shows disease-specific changes of T cell and macrophage populations in human achalasia. Nat Commun. 2023;14(1):4685. Published 2023 Aug 4. doi:10.1038/s41467-023-39750-5；【IF=18.1】

[2] Gao H, Liu S, Mai Y, et al. Combined therapy of prednisone and mTOR inhibitor sirolimus for treating retroperitoneal fibrosis. Ann Rheum Dis. 2023;82(5):688-697. doi:10.1136/ard-2022-223736；【IF=24.0】