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上海伯豪生物技术有限公司

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    伯豪生物

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    上海

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    体外诊断、实验室仪器 / 设备、细胞库 / 细胞培养、技术服务、论文服务、试剂、耗材

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CUT&Tag技术服务:蛋白-DNA互作研究(内含特惠福利)

0 人阅读发布时间:2026-11-02 13:47

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Cleavage Under Target & Tagmentation(CUT&Tag) 是一种新兴的DNA- 蛋白质互作研究方法。CUT&Tag 以融合了Protein A/G 的转座酶为核心,融合蛋白通过Protein A/G与抗体结合,使得转座酶被栓系在靶位点周围,从而在目的位点附近进行酶切反应,并同时引入二代测序所必需的接头序列,产物DNA 经过后续提取与PCR 扩增后得到文库,可直接用于高通量测序。

 

01

技术原理

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细胞被固定在刀豆蛋白磁珠(ConA 磁珠)表面,然后加入洋地黄皂苷(Digitonin)透化细胞膜,依次进行一抗、二抗、转座体的孵育及片段化,反应产物经过DNA 提取、PCR 富集完成二代测序文库的构建。对于人源细胞常规的组蛋白修饰,仅需进行3-5M reads的测序量就能得到高分辨率的全基因组图谱。

 

02

技术优势

▪ 信噪比高

CUT&Tag有更低的背景,更强的信号。

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▪ 分辨率高

相同测序深度,CUT&Tag获取的Peak数高

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03

应用方向

▪组蛋白修饰:无论是常染色质还是异染色质,都可以利用CUT&Tag技术进行探索组蛋白修饰情况。

▪转录因子:转录因子按照CUT&Tag正常实验推荐的细胞量即可进行实验。

▪全基因组结合蛋白:除了组蛋白和转录因子外,基因组上其他结合蛋白同样适用CUT&Tag技术。

▪标签蛋白:若DNA结合蛋白找不到合适的抗体时,可以将靶蛋白和标签核酸序列连接一起,转基因表达。用抗标签抗体进行试验。

▪间接结合蛋白:有些蛋白并不直接结合DNA,而是与直接结合DNA的蛋白结合,同样可以进行CUT&Tag实验。

▪R-Loop结构:R-Loop结构为DNA和RNA杂交链,没有靶蛋白结合。但是有特异性抗体识别,同样可以进行CUT&Tag实验。

 

04

已验证抗体清单

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所需抗体若为非列表内,需提供抗体名称、货号、物种等信息进行评估,且需自行提供

 

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