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重组蛋白分子量太大,110KD左右,镍柱纯化一直不成功,试了一系列咪唑梯度,每次都是杂蛋白跟着目的蛋白一起洗脱下来,甚至10mM咪唑都能把目的蛋白一下来。80KD左右有一条杂蛋白就跟牛皮糖似的,跟目的蛋白如影随形。 我用的pet32a载体,有两个his标签。在不重新设计添加his标签的引物的情况下,该怎么获得纯化蛋白呢?急求,在线等!
提问者: 匿名用户
发布时间:2016-12-15 22:18
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