试剂盒项目文章 | NEO1通过cPLA2-MAVS信号通路调控蛛网膜下腔出血中A1型星形胶质细胞极化

蛛网膜下腔出血（SAH）后的神经炎症在多种病理通路和不良预后中起着关键作用。已有研究表明，静息状态的星形胶质细胞在SAH后可极化形成至少两种不同表型：促炎的A1表型和抗炎的A2表型。单细胞测序结果显示，SAH后A1星形胶质细胞数量增加，NEO1可能参与星形胶质细胞极化过程。作者通过将NEO1fl/fl小鼠与GFAP-Cre小鼠杂交，构建了星形胶质细胞特异性NEO1条件性敲除（cKO）小鼠。利用血管内穿刺诱导的SAH小鼠模型，作者发现NEO1下调可显著抑制A1星形胶质细胞极化，并减少相关炎症因子的释放。星形胶质细胞中NEO1敲除后，cPLA2、MAVS和NF-KB的mRNA水平显著降低。已知cPLA2-MAVS相互作用在激活NF-KB转录程序中发挥重要作用，基于此作者推测NEO1通过该信号通路发挥作用，并通过体外实验，验证了这一假设。米格鲁司他（miglustat）给药可显著减轻SAH后的神经炎症，并改善神经功能恢复。综上，本文研究结果表明，抑制NEO1可通过cPLA2-MAVS通路减轻SAH后A1星形胶质细胞极化。

伯优^®细胞核分离试剂盒

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1. SAH后星形胶质细胞极化呈现时间特异性，NEO1表达下调

为阐明蛛网膜下腔出血（SAH）后星形胶质细胞极化状态的改变，研究人员在动物模型建立24小时后收集实验组和对照组小鼠的脑组织进行单细胞测序。结果显示，SAH后小鼠脑组织中星形胶质细胞可分为A1和A2两个反应性亚群，其中A1星形胶质细胞数量在SAH后1天显著增加，且差异基因富集于转录因子结合和细胞因子活性相关功能，提示其在早期神经炎症中的核心作用。Western blot验证显示，SAH后C3蛋白表达逐渐升高，2天达峰值，而S100A10在1天短暂抑制后逐渐升高；NEO1表达从SAH后1天开始下调，2-3天显著降低，且神经功能缺损在1天最为严重，这些时间特征表明，SAH后第1天是后续机制研究和治疗研究的关键窗口期。

2. 星形胶质细胞特异性敲除NEO1抑制A1极化，改善神经炎症微环境

基于已有研究，作者推测NEO1在SAH后调控星形胶质细胞极化。为验证这一假设，作者构建了皮质星形胶质细胞特异性NEO1条件性敲除（cKO）小鼠。实验分为四组：对照组、NEO1 cKO组、SAH组和NEO1 cKO+SAH组。结果显示，与SAH组相比，NEO1 cKO+SAH组小鼠脑组织中A1表型标志物C3的蛋白表达显著降低，免疫荧光显示C3+GFAP+细胞比例减少，而A2表型标志物S100A10表达升高，S100A10+GFAP+细胞比例增加，流式细胞术进一步验证了这一转变。炎症因子检测显示，NEO1敲除显著后IL-1α、IL-1β、IL-18、TNF-α等促炎因子水平降低，抗炎因子IL-10表达升高，同时Fluoro-Jade阳性退变神经元数量减少，神经元超微结构有明显改善，表明NEO1敲除可通过调节星形胶质细胞极化减轻神经炎症和神经元损伤。

3. NEO1通过cPLA2-MAVS-NF-KB通路调控星形胶质细胞极化

为探究NEO1介导的星胶极化的分子机制，研究人员对星胶特异性NEO1 cKO小鼠的大脑皮质组织进行转录组测序。结果显示，NEO1 cKO小鼠脑组织中cPLA2（PLA2G4A）、MAVS、NF-KB（NFKB1）的mRNA水平显著下调，Western blot验证显示，NEO1敲除后cPLA2、MAVS、NF-KB及磷酸化NF-KB的蛋白表达均显著降低。免疫荧光共定位显示，NEO1 cKO小鼠脑组织中cPLA2+MAVS+GFAP+三重阳性细胞比例减少，体外实验进一步证实，HB刺激可诱导原代星形胶质细胞中cPLA2、MAVS表达升高，而NEO1敲除可逆转这一效应。慢病毒介导cPLA2过表达后，NEO1敲除引起的C3表达降低、S100A10表达升高现象被显著逆转，同时促炎因子水平回升，神经元毒性增强，直接证明cPLA2-MAVS通路是NEO1调控星形胶质细胞极化的关键下游机制。

4.米格鲁司他靶向通路改善SAH预后

作者采用600mg/kg剂量，研究米格鲁司他（miglustat）对SAH后神经炎症的影响。Western blot表明，米格鲁司他给药抑制A1星形胶质细胞极化，促进A2星形胶质细胞极化。SAH+miglustat组小鼠的改良Garcia评分显著高于SAH组，脑含水量显著降低，旷场实验中运动功能和探索行为明显改善。机制上，米格鲁司他处理后C3表达显著降低，S100A10表达升高，同时促炎因子（IL-1α、IL-1β等）下调，IL-10上调， Fluoro-Jade阳性退变神经元数量减少，表明米格鲁司他通过抑制cPLA2-MAVS通路，调节星形胶质细胞极化，从而减轻神经炎症和脑损伤。

该研究通过严谨的实验设计，首次阐明了NEO1在SAH后A1星形胶质细胞极化中的关键调控作用，建立了“NEO1-cPLA2-MAVS-NF-KB”调控网络，为理解SAH后神经炎症的分子机制提供了全新视角。星形胶质细胞特异性敲除NEO1和米格鲁司他干预的显著疗效，证实了该通路作为治疗靶点的可行性，尤其米格鲁司他作为已获批临床应用的药物，其在SAH中的转化潜力为临床治疗提供了新的快速转化方向。

参考文献：

1. Wu Y., Wei B., Jin L. et al. NEO1 modulates the A1 astrocyte polarization in subarachnoid hemorrhage through the cPLA2-MAVS signaling pathway. J Neuroinflammation (2025). s12974-025-03643-9